של ה מבחן אליזה היא בדיקת מעבדה רפואית המביאה לתגובה מה שנקרא אנטיגן-נוגדן. ניתן לבדוק אנטיגנים שונים הממלאים תפקיד ברפואה אנושית או וטרינרית. בגרמניה, רק מכוני מעבדה מוסמכים מוזמנים לבצע את הבדיקה.
מה הנוהל?
ELISA הוא הקיצור של Assay Linked Immuno Sorbent Assay. לפיכך זהו שם בשפה האנגלית, אך הוא התבסס בשימוש רפואי גרמני.
בדיקת ELISA היא אחת מהשיטות המכונות שיטות אימונולוגיות בבדיקות מעבדה רפואיות. ניתן להשתמש בהליך הבדיקה לגילוי מולקולות חלבון במגוון רחב של נוזלי גוף. איתור מולקולות אלה מאפשר בתורו להסיק מסקנות לגבי מחלות או תמונות קליניות מסוימות, וזו הסיבה שהרופאים גם הופכים את האבחנה שלהם לתלויה בבדיקת ELISA כזו. הליך הבדיקה הוא אפוא חשוב מאוד בתרגול קליני יומיומי, חוץ או אשפוז.
נוזלי הגוף המתאימים, למשל דם מלא או נוזלים מהמפרקים, נשלחים ישירות למעבדה לאחר שנלקחו מהמטופל. הדגימות בדרך כלל מאוד דחופות, מכיוון שהחומר המקורי נחשב רגיש ויש לבחון אותו בהקדם האפשרי. דגימות מכוסות שכביכול יכולות להביא לתוצאות שליליות כוזבות מכיוון שהחלבונים הפתולוגיים שאותרו בינתיים הופחתו או נשברו לחלוטין. מה שנקרא ניתוח מקדים ממלא תפקיד חשוב ב- ELISA; יש לחזור שוב על תוצאות חשודות או שליליים אם יש תסמינים קליניים.
פונקציה, אפקט ומטרות
מבחנות וצלחות microtiter כביכול חיוניות לבדיקה נכונה במעבדה רפואית מוסמכת. צלחות אלה עם כיפויים דקים וקעורים למחצה עשויים פלסטיק מיוחד ומצופים כל אחד בנוגדן מאוד ספציפי.
אם האנטיגן שיגלה יהיה בנוזל גוף שיש לבדיקתו, מתרחשת תגובה ספציפית לנוגדן-נוגדן על פי מה שמכונה עקרון המנעול והמפתח. צוות המעבדה יכול להכניס את חומר הדגימה לצלחות או באופן ידני באמצעות פיפטות או באופן מלא. במכוני מעבדה רפואית מודרנית משתמשים במערכות אוטומטיות מלאות בלבד לצורך ביצוע אבחנות ELISA.
עם זאת, יש לפקח על אלה על ידי אנשי צוות מיומנים, עוזרי מעבדה רפואיים-טכניים. מה שמכונה בקרת איכות פנימית וחיצונית היא גם באחריות צוות המעבדה, אשר מורשה לצוות הרפואי לרפואת מעבדה, אפידמיולוגיה של זיהום ומיקרוביולוגיה. לאחר הניסיון הראשון, כלומר לאחר פליטת החומר על הצלחות, האנטיגנים הספציפיים במדגם, אם קיימים, כבר נקשרו לנוגדנים בצלחת הפלסטיק.
לאחר מכן מתקיים מחזור שטיפה עם תמיסת מלח פיזיולוגית על מנת להסיר גורמים משבשים כמו אנטיגנים בלתי רצויים או חלבונים מהצוות. שלב זה חשוב מאוד כדי להימנע מתגובות חיוביות שגויות. לתוצאה חיובית כביכול שהמעבדה מפרשת אותה באופן שגוי יכולה להיות בנסיבות מסוימות השלכות קטלניות על המטופל. בשלב השני של החקירה מתווסף נוגדן נוסף, המקושר לאנזים. נוגדן שכותרתו זה נקשר גם לאנטיגן.
בשלב שלישי ואחרון מוסיפים צבע מיוחד בכמות מוגדרת, המתפרקת במידה רבה יותר או פחות על ידי שאריות האנזים הנותרים. ניתן לפרק רק אנזים זה שלא נקשר בעבר לאנטיגן יחד עם הנוגדן. האנזים החופשי מסוגל לקטר את הצבע הנוסף. ניתן לקבוע את הכמות המדויקת של הצבע המפוצל בשיטת מעבדה רפואית נוספת, מה שמכונה פוטומטריה. זה מאפשר להסיק מסקנה מדויקת האם וכמה אנטיגן קיים בחומר מדגימה.
בדיקת ELISA לא משמשת רק לאבחון הראשוני או לביסוס אבחנות חשודות במחלות מסוימות ובתמונות קליניות, אלא גם למעקב אחר התקדמותן. אם ריכוז האנטיגן בבדיקה הופך נמוך יותר במהלך הטיפול, הטיפול נחשב כמוצלח.
אתה יכול למצוא את התרופות שלך כאן
➔ תרופות לחיזוק ההגנה ומערכת החיסוןסיכונים, תופעות לוואי וסכנות
בדיקת ELISA אינפורמטיבית במיוחד באמצעות איתור מבנים אנטיגניים בנוזלי גוף. הבדיקה מאפשרת אמירה כביכול איכותית אך גם כמותית-כמותית לגבי נוכחותם המשוערת של אנטיגנים מסוימים בנוזלי גוף.
לא ניתן להשתמש בדם שלם לבדיקה, רק סרום דם. בדיקה ישירה על המטופל, למשל מהדם הנימי של קצות האצבעות, היא, כמו עם כמה בדיקות סרולוגיות אחרות, עד כה לא אפשרית. ברפואה האנושית משתמשים בעיקר בבדיקת ELISA לגילוי אנטיגנים בזיהומים חיידקיים, נגיפיים או פטרייתיים. בנוסף, כל התוצאות החיוביות של סרולוגית הפטיטיס נבדקות שוב עם בדיקת ELISA כסטנדרט.
ניתן לקבוע הורמונים מסוימים, כמו הורמון ההריון HCG, באמצעות בדיקת ELISA. אם מתרחשים סיבוכים מסוימים במהלך ההיריון, ידיעה מדויקת על ריכוז הורמון ההריון בדם מועילה מאוד מבחינה אבחנתית וטיפולית. אזור אינדיקציה נוסף לבדיקה הוא איתור פרפרוטאינים כביכול בשתן, שכן הם מופיעים, למשל, במחלות גידול שונות כמו למשל מיאלומה נפוצה.
בדיקת ELISA מתבצעת עדיין במכוני מעבדה רבים כיום, אך נחשבת מיושנת על ידי מומחים. התגובה החיסונית הקשורה לאנזים בבדיקת ELISA הוחלפה יותר ויותר בשנים האחרונות על ידי נוגדנים עם תווית רדיואקטיבית המספקים תוצאות כמותיות טובות עוד יותר. בדיקות אלה ידועות גם בשם RIA, Radio Immunoabsorbent Assay. פיתוחים נוספים ספציפיים נוספים של ה- ELISA הם שיטות כימיות קלילות כמו זוהר או פלואורסצנט.
.jpg)
.jpg)
