איתור ישיר של אימונופרואורסואנס

עדות למבני רקמות, נוגדנים ופתוגנים באמצעות תיוג חיסוני היא פופולרית, מודרנית ומדויקת. חיסון פלואורסצנטי מתייחס לתיוג חיסוני עם נוגדנים מוכנים ופלורסנטיים שגורמים לזהור תחת אור UV.

ב איתור ישיר של אימונופרואורסואנס המצע נבדק ישירות עם נוגדנים זוהרים, ללא נוגדנים ראשוניים או אנטיגנים מלאכותיים.

מהי איתור ישיר של חיסון פלואורסצנטי?

איתור ישיר של חיסון פלואורסצנטי הוא שיטת אבחון המבוססת על ידע באימונולוגיה, חיסון חיסון ואימונוהיסטוכימיה. המיקוד כאן הוא ביכולתם של נוגדנים להיקשר לנקודות ספציפיות ברקמה או לאנטיגנים בסרום. המקומות האלה הם אפיטופים.

באבחון ביוכימי, ישנם נוגדנים מלאכותיים או מיממטיקה (יחיד: חיקוי) המאפשרים לסמן קשרים נוגדנים-אנטיגן אלה על ידי פלואורסצנט או רדיואקטיביות. מצומפי נוגדנים מלאכותיים נקשרים מצד אחד לאפיטופים ומצד שני יש סמן פלואורסצנטי במקרה של אימונופוראורסנציה. זוהי אלטרנטיבה לשימוש בסמנים רדיואקטיביים. הדבר המיוחד בגילוי ישיר של אימונוס פלואורסצנציה בהשוואה לגילוי עקיף הוא שהנוגדן הנקשר לאפיתופ של האנטיגן בחומר שנבדק מייצג גם את הנוגדן הנוקר עם הסמן הניאון. נוגדנים נוספים אינם נחוצים לגילוי ישיר.

פלואורסצ'ין, המאיר תחת אור UV, ו- Isothiocyanate פלואורסצין (FITC) משמשים כצבעים לייצור הנוגדנים המלאכותיים בשילוב של אי-פלואורסצנציה. עד כה הוא קורא מעט מסובך, אולם איתור ישיר של אימונוס פלואורסצנציה הוא שיטת אבחון מעבדה רפואית סטנדרטית למגוון רחב של שאלות רפואיות. הנוגדנים עם הצבע הניאון מוכנים למכירה.

פונקציה, אפקט ומטרות

זיהוי ישיר של אימונוס פלואורסצנטי זמין לבדיקות רקמות לצורך מכתים של מבנים מסוימים ברקמה. אבל הם זמינים גם לתאים בודדים. ציטומטריה זרימה ממלאת כאן תפקיד מרכזי. לבסוף, ישנן מבחני החיסון בשלב המוצק והנוזלי. בדיקות אימונוס פלואורסצנטי של רקמות חשובות במיוחד באונקולוגיה, כלומר הטיפול הרפואי במחלות סרטן.

ניתן לאתר אנטיגנים ספציפיים לגידול ברקמת הגידול ישירות בעזרת אימונופורורצנציה. בדיקות אלה על דגימות רקמות מגידולים חשובות לרוב על מנת לגלות מאיפה הגיעו הגרורות הקיימות בגוף, או על מנת לפסוק אם גידול שפיר או ממאיר. בדיקת תאים בודדים עם זיהוי ישיר של פלואורסצנציה משמשת למציאת אנטיגנים נגיפים, אנטיגנים חיידקיים ואפיטופים אחרים.

לדוגמה, תוכלו לגלות האם התאים נגועים בנגיף ובאיזו שלב של מחזור ההדבקה בו נמצאים התאים. השם FACS (= מיון תאים מופעל בקרינה) הוא שיטת ציטומטריה זרימה יעילה ביותר בה התאים המסומנים עם פלואורסצנציה מופצים לצינורות מבחן שונים, תלוי בסוג הצבע. הליך זה חשוב באימונולוגיה, המטולוגיה ומחלות זיהומיות.

מבחני חיסון נגד פלואורסצנציה מאפשרים גילוי ישיר של רעלים סביבתיים, אורגניזמים מהונדסים גנטית ותוספים מסוימים במזון. במערך הניסיוני הזה תמיד יש שלב מוצק ונוזל. ניתן היה לאתר באופן ישיר מספר פתוגנים, כולל נגיף ה- HIV הגורם לאיידס. עם זאת, כאשר מגלים מחלות זיהומיות ואוטואימוניות, לרוב מדובר באיתור נוגדנים ולא באנטיגנים. אלה מולקולות ההגנה הנוצרות על ידי מערכת החיסון של הגוף. על פי ההגדרה המובאת כאן, הוכחות מסוג זה אינן הוכחות ישירות מכיוון שהנוגדנים הניאון אינם מתיישרים ישירות לאנטיגנים של הגוף עצמו, אלא לאנטיגנים של סידור הבדיקה.

אנטיגנים אלה במערך הניסוי קשורים בתורם לנוגדנים של הגוף עצמו. גילוי ישיר של אימונוס פלואורסצנטי לזיהומים שכיחים, למשל נגיפי HIV וכלמידיה, משמש רק בבדיקות גילוי ואישור מיוחדות. יש בדיקות להרבה יותר מחלות. ברוב המצבים, גילוי עקיף של נוגדנים מתאים יותר למחלות זיהומיות, מכיוון שלמערכת החיסון של הגוף עצמו יש יכולת גאונית לזכור זיהומים קודמים. במצבים אחרים, גילוי ישיר של אנטיגנים וגילוי עקיף של נוגדנים משלימים זה את זה. האחרונים מראים כי זיהום התרחש בעבר, בעוד שהראשונים מספקים מידע מדויק יותר על המצב הנוכחי של פעילות הפתוגן.

אתה יכול למצוא את התרופות שלך כאן

סיכונים, תופעות לוואי וסכנות

עם איתור ישיר של אימונוס פלואורסצנציה, כמו בכל הראיות הרפואיות, ישנם שני סיכונים: הסיכון לתוצאה שגויה, חיובית והסיכון לתוצאה כוזבת, שלילית. תוצאות שגויות וחיוביות גורמות לאי נוחות פסיכולוגית ולחץ רב עבור המטופל.

לפיכך, נוספים נהלי בדיקה נוספים לתוצאות חיוביות, במיוחד אם האבחנה גורמת לשינויים דרסטיים בחיים. הסיכון לתוצאה כוזבת ושלילית הוא שהמטופל לא לומד על האיום על בריאותו שלו ואולי אפילו על בריאות הציבור בזמן טוב. לפיכך, טוב לעשות הרבה מחקר ולהציע ולהציע מספר גדול של זיהויים ישירים של אימונופוראורסנציה מוכנים למכירה. יחד עם שיטות גילוי ישירות ועקיפות אחרות למחלות ופתולוגיות זה מגביר את רמת הדיוק של האבחנה.

גילוי ישיר מבוסס על צמיד הנוגדנים, שמצד אחד נקשר לאפיטופים של האנטיגנים ומצד שני גורם גם לפלואורסצנטיות. מוצר כזה משמש אפוא רק בסוג אחד של הליך בדיקה ואינו משמש לסוגים אחרים של הליך בדיקה.זהו הבדל פרוצדורלי לעדויות העקיפות, בהן מקדימים את הנוגדנים הפלורסנטיים על ידי נוגדנים ראשוניים לקשירת אפיטופים. איחוד הנוגדנים מתאים אפוא לבדיקות שונות. הבדל פרוצדוראלי זה שונה מההבדל הרפואי בין גילוי עקיף של נוגדנים לגילוי ישיר של אנטיגנים.